样品编号: 检验开始时间: 年 月 日 样品名称: 检验完成时间: 年 月 日 检测项目: 检测依据: 一、菌落总数/霉菌酵母菌落数测定: 无菌操作称(量)取样品25g或ml加入225ml的无菌生理盐水中,均质2分钟,做成1∶
10样品液。取1∶10稀释液1ml加入到9ml生理盐水中,混匀,做成1∶100样品均液。以上法制备10倍系列稀释样品均液。选择2-3个适宜稀释度的样品均液,吸取1ml样品均液于无菌平皿内,每个稀释度做2个平皿。同时,分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照,及时将15-20ml冷至46℃的平板计数培养基倾注平皿,转动平皿使其混合均匀,凝固后翻转平板,置 36℃±1℃ 培养 小时,计数平板上菌落数(CFU)。霉菌和酵母菌计数采用孟加拉红培养基,正置,28℃±1℃ 培养 天,计数平板上菌落数(CFU)。 稀 释 度 菌落总数(CFU/板) 霉菌菌落数(CFU/板) 酵母菌落数(CFU/板) lO 0lO -110 -210 -310 -4 空白对照 计算及结果: 菌落总数(CFU/g,ml):
霉菌菌落数(CFU/g,ml):
酵母菌落数(CFU/g,ml):
二、大肠菌群测定(MPN计数法):
按菌落总数测定方法制备lO、10、10、10、10……稀释液。选择3个适宜的连续稀释度的样品均液,每个稀释度接种3管乳糖胆盐发酵管内,每管接种1ml(接种量在1mL以上者,则用双料乳糖胆盐发酵管),36℃±1℃培养箱培养24h±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告大肠菌群阴性;如有产气,将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36℃±1℃培养箱培养18h~24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和验证试验。在上述平板上,挑去1~2个进行革兰氏颜色,同时接种乳糖发酵管,置36℃±1℃培养箱培养24h±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。 接种量g,ml 乳糖胆盐(MPN法) EMB分离培养 革兰氏染色镜检 乳糖发酵管 0
-1
-2
-3
-4
培养时间(h) 培养温度(℃) 空白 / 36±1 / 36±1 / 注:○+产酸产气;+产酸不产气或有可疑菌落;-不产酸不产气或无可疑菌落;G-b革兰氏阴性杆菌;G+b革兰氏阳性杆菌;G+c革兰氏阳性球菌。
结果:根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,得 MPN/100g(ml)。
电子天平编号: 使用状况 试验前: 试验后:
培养箱编号: 使用状况 试验前: 试验后: 检测人: 校核人: 审核人:
样品编号:
按菌落总数测定方法制备lO0、10-1、10-2、10-3、10-4……稀释液。选择3个适宜的连
续稀释度的样品均液,每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管接种1ml(接种量超过1ml,则用双料LST肉汤),36℃±1℃培养24h±2h,观察倒管内是否有气泡产生,对于24h±2h产气者,用接种环从产气的LST肉汤中分别取培养物一环,移种到BGLB管中,36℃±1℃培养48h±2h进行复发酵实验,观察产气情况,产气者记为大肠菌群阳性,对于未产气者,则继续培养至48h±2h,观察,产气者进行复发酵实验,未产气者为大肠菌群阴性。 接种量g,ml LST初发酵(MPN法) 培养时间(h) 培养温度(℃) 空白 36±1 36±1 36±1 BGLB肉汤复发酵 注:○+产气;-不产气; 结果:根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,得 MPN/g(ml)。
三、致病菌检验:
检 验 项 目 沙门氏菌 志贺氏菌 金黄色葡萄球菌 (定性检验) β型溶血 性链球菌 接 种 量 前 培 养 基 增 培养温度 菌 培养时间 增 菌 培 养 培养温度 培养时间 培 养 基 25g,ml BPW 225ml 25g,ml 25g,ml 25g,ml 36±1℃ / 18h 1 ml + TTB 10ml 42±1℃ 24h 1 ml+ SC 10ml 36±1℃ 24h 志贺氏菌增菌肉汤 225ml 41.5±1℃(厌氧) 20h 志贺氏 分 离 培 养 培养温度 培养时间 结 果 36±1℃ 48h 36±1℃ 24h 36±1℃ 24h 培 养 基 BS XLD XLD 菌显色 培养基 36±1℃ 24h / / mTSB 225ml 36±1℃ 24h 哥伦比亚 血平板 CAN 血平板 36±1℃ 24h 36±1℃(厌氧) 24h 7.5%氯化钠肉汤225ml 36±1℃ 24h Baird-Parker 平板 36±1℃ 48h 生 化 及 血 清 学 试 验 结果(/25g,ml) 结果: 结果: 结果: 结果: 注:+生长或有可疑菌落;-未生长或无可疑菌落。
电子天平编号: 使用状况 试验前: 试验后: 培养箱编号: 使用状况 试验前: 试验后: 检测人: 校核人: 审核人:
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