发布网友 发布时间:2024-10-24 05:33
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热心网友 时间:2024-11-06 04:33
本文深入解析了单卵裂球在建立小鼠胚胎干细胞系中的研究进展。胚胎干细胞因其全能性及在细胞生物学、发育生物学等领域的广泛应用,备受关注。传统从囊胚内细胞团分离ES细胞的方法虽然具有潜力,但引发了伦理争议。为解决这一问题,科学家们探索了从着床前小鼠胚胎单卵裂球构建ES细胞系的新途径。
研究者通过MTT法发现,丝裂霉素C处理后的第1单卵细胞球在3、5代MEF中,经过2或3小时处理后,形态稳定且活力维持良好,是制备饲养层的理想条件。在MEF共培养体系下,比较了KSOM和mES培养液,结果表明KSOM+mES连续培养对ES细胞形成更为有利,且不影响Cdx2和Sox-2阳性细胞的比率。共建立了71个ES样细胞系,其中2CBD细胞团的成功率较高,而4CBD和8CBD则相对较低。值得注意的是,随着胚胎发育阶段的提高,单卵裂球建立ES细胞的成功率下降,可能与姐妹卵裂球的分化潜能差异有关。
研究进一步探究了饲养层细胞对ES细胞建立的影响,发现即使不添加LIF,单卵裂球也能形成初级扩展生长。LIF的存在虽然能促进ES细胞的建立,但饲养层细胞的作用更为关键。此外,LIF与MEK1/2抑制剂PD98059的协同作用在ES细胞的自我更新和分化平衡中扮演重要角色。研究结果证实,单卵裂球具有建立ES细胞的潜能,且成功率与胚胎发育阶段呈负相关。
总的来说,尽管单卵裂球建立ES细胞的过程存在挑战,但通过优化的培养体系和深入研究,这一方法为解决伦理问题并提升ES细胞临床应用提供了新的可能。未来,进一步优化技术将有望提高单卵裂球ES细胞的成功率和效率。