全自动生化试剂分析论文

【关键词】试剂排序

【摘要】LI的探讨全自动生化分析仪的试剂的合理排序，以提高检测的准确 度。方法终点法、酶法在不同条件下测定结果的比较。结果试剂排序不合理影响 结果准确度。结论全自动主化分析仪的应用，应注意试剂的合理排列，以提高检 测结果的准确性。

【关键词】试剂排序；误差；准确度

全自动生化分析仪的自净率是有限的，随着仪器使用周期延长及多种主客观 因素的影响，增加了试剂探针污染携带率，检测试剂排序不当，就可能出现不可 逆转的误差，直接影响检测结果的可鼎性，很容易给临床造成无效数据，直接影 响临床诊疗水平。通过长期临床检测实践并参考相关文献内容，归纳出临床生化 检测试剂的排列顺序，使同一份标本在进行多项忖检测时，尽量减小因试剂间相 互干扰引起的误差，提高了批检测结果的准确性。

1材料与方法 1.1检测标本

（1）待检血清：门诊、住院病人静脉血清；（2）质控血清：Roche公司提

供;

（3）标准液：Roche公司、北京利德曼生化技术有限公司提供。

1. 2检测试剂

Roche原装及北京利德曼生化技术有限公司成品试剂盒。 1. 3检测仪器

RocheM0DULAR2p生化分析仪。 1.4检测方法

各检测项LI参数通过电脑输入，操作严格按照仪器使用手册及试剂说明进 行。

2结果与原则

2. 1试剂的排列顺序与方法学

见表1。表1试剂的排列顺序与方法学（略）

2. 2试剂排序原则

2. 2. 1按反应所需pH

（1） pH<5 放在前。如 DBI、TBI、ALB： （2） pH~7。如 ALT、AST、HBDH、 BUN、CK-MB、CK、Cho、TG、HDL、Glu、UA；（ 3） pH>8。如：y-GT. ALP、LDH、 Cd、 GSP、 Cr% TPo

2. 2. 2按试剂所含成分

（1）缓冲液成分。如磷酸盐缓冲液，Tris缓冲液；（2）辅酶种类。如NADH、 NADPHo

2.2.3按检测反应的性质

（1）终点法，速率法，免疫比浊法；（2）双缩腺法测TP放于末位，利用

双 缩腺试剂去蛋白去污的作用；（3）苦味酸试剂污染较重，且不易清除，尽量往后 面放。

2.3实验结果 2. 3. 1终点法

见表2、表3。表2pH值的影响（略）表3反应物干扰（略）

2. 3. 2速率法

见表4、表5。表4pH值的影响（略）表5反应物的影响（略）

3结论与分析 3.1结论

检测试剂合理有序排列，能减少探针携带误差，提高检测结果的准确度。

3. 2分析 3.2. 1终点反应

（l）pH值改变：反应物之间，反应物缓冲液之间因携带误差而使pH值改

变, 反应达不到终点。如双缩服法测血清总蛋口，若其他条件相同，反应在碱性

（pH 值8〜9）条件时，蛋口肽键（一C0XH）才都能与碱性铜溶液作用生成紫色反

应， 完全测出血清蛋口的总量。若pH<8时，总蛋口测定结果偏低，直接影响球蛋口、 口蛋口/球蛋口的结果。（2）缓冲液混入反应物：磷酸盐缓冲液混入无机磷试剂, 会使检测结果偏高。应将含有磷酸盐缓冲液的检测项U放于无机磷后检测。如 G0D-P0P 法测 Gluo

3. 2. 2速率法反应

9

（1）辅酶结构：辅酶参与反应时，其还原型、氧化型在340nm处曲线变化 是

相悖的，山携带误差使上升反应或下降反应不彻底，导致无效值出现。（2）最 适

pH值：酶活力测定在最适pH值时，反应最快，灵敬度最高，但是因为缓冲能 力

有限，可因携带误差使酶促反应出现无效值。大多数酶反应pH值在6.0〜7. 5 之间；ALP、丫-GT、LDH须在碱性条件下最适宜。

3.2.3反应物间的作用

（1）CK检测不应在ALP、Ca检测之间，因CK反应液中加入EDTA-Nm能抑 制ALP活性，结合Ca而使结果偏低。（2） ALT、AST反应液中均含有LDH,可干 扰LDH检测结果。（3） Cho, Glu, UA, HBDH用PBS缓冲液，干扰无机磷测定。（4） BUX酶法测定因谷氨酸脱氢酶（GLDH）消耗NADH,不易放在底物NADH如ALT、AST 项LI前检测。（5）同时测定一个项LI的不同标本（血、尿、脑脊液等）：应将不 同

标本放入不同通道测定。临床生化检测应注重试剂的合理排序，严格按规程操 作，及时清除试剂瓶口处结晶，以免导致试剂水平检测错误；对于稳定性差的试 剂尽量减少与空气接触面积；有沉淀、变浑浊及颜色异常改变的试剂及时更换， 尽量清除无效值，提高生化检测的实效性；为临床诊断发挥其应有的作用。