元胡水煮液对炎症痛大鼠的镇痛作用

中国老年学杂志２０１８年７月第３８卷　元胡水煮液对炎症痛大鼠的镇痛作用　于晓利　胡文昭　梁　雪　袁瑞。　沈　勇　周　强　付立波　（长春师范大学生命科学学院，吉林［摘要］　目的长春１３００３２）　通过在大鼠足底注射鹿角菜而建立炎症痛大　研究元胡水煮液对炎症痛大鼠的镇痛及其调节作用。方法鼠模型，然后分别采用浓度为２４、４８和９６　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液对炎症痛大鼠进行灌胃，分别利用热板和压板测痛仪记录炎症痛大鼠　在灌胃５、ｌ０、１５、２０、３Ｏ、４５和６０　ｍｉｎ后７个时间点上的后爪缩爪反应潜伏期（ＨＷＬ），观察元胡对炎症痛模型大鼠的痛觉调节活动　的影响。结果与灌生理盐水相比较，炎症痛大鼠灌９６　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液的左、右爪热板和压板的ＨＷＬ均有显著差异（均Ｐ＜　０．０１），而炎症痛大鼠灌２４　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液的左、右爪压板的ＨＷＬ有极显著差异（Ｐ＜０．００１），炎症痛大鼠灌４８　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮　液的左、右爪压板的ＨＷＬ均有显著差异（Ｐ＜０．０１），表明元胡水煮液对炎症痛大鼠具有镇痛作用。结论元胡水煮液对炎症痛大　鼠疼痛具有调节作用。　［关键词］元胡；后爪缩爪反应潜伏期；炎症；镇痛；热板测痛仪；压板镇痛仪　［中图分类号］Ｒ２８５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００５－９２０２（２０１８）１４－３４６２４）３；ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－９２０２．２０１８．１４．０４９　元胡，又名延胡索、玄胡，为罂粟科紫堇属多年生　草本植物，在《本草纲目》中归纳元胡有“活血，利气，　止痛，通小便”４大功效，并推崇元胡“能行血中气滞，　气中血滞，故专治一身上下诸痛”。以块茎入药，其调　经止痛功效尤为显著，ｌ临床上常将元胡用于治疗痛经、　血虚头痛、腰腹疼痛等症。元胡止痛方主要由延胡索　和白芷组成；元胡在治疗痛经方面是通过抑制子宫收　缩起直接镇痛作用。炎症是疼痛最常见的原因之一，　临床上很多原因不明的疼痛实际上是由于软组织的无　菌性炎症所致¨　。所以，只有建立炎症痛动物模型以　研究炎症痛的特征及其作用机制，才可以为研究更有　效的镇痛方法提供支持与帮助。炎症过程一般在注射　后３～４　ｈ内开始，炎症症状一般能在２４　ｈ后基本复　原　。已经有研究表明，给实验性偏头痛大鼠灌胃元　胡止痛胶囊有明显的镇痛作用　ｊ。但至今尚未发现　有元胡水煮液对慢性痛当中的炎症痛大鼠的镇痛效　果，为进一步研究元胡镇痛作用，本实验以鹿角菜作为　致炎剂建立炎症痛模型，采用元胡水煮液对炎症痛大　鼠灌胃方法，以热板和压板测痛仪对大鼠进行痛觉测　试，来研究元胡水煮液对炎症痛大鼠的镇痛作用。　１材料与方法　饮水，确保自然光照，饲养温度控制在（２２＿＋２）ｃｃ，确保　恒定的昼夜节律的生活环境。实验中尽量减少大鼠的　使用数量，并尽可能减少其他因素对大鼠所造成的不　良影响。　１．２主要试剂与仪器元胡，购于义善堂大药房南广　场店。称取元胡于瓷缸中，加入蒸馏水煮沸后获得元　胡水煮液母液，然后用母液配制浓度分别为２４、４８、　９６　ｍｇ／ｍｌ的元胡水煮液；生理盐水由长春豪邦药业有　限公司制造，鹿角菜为Ｓｉｇｍａ公司制造的产品；智能热　板仪（ＹＬＳ－６Ｂ），电子压痛仪（ＹＬＳ－３Ｅ）均来自于安徽　省的淮北正华生物仪器设备有限公司。　１．３炎症痛模型的建立与行为测痛　在大鼠右侧足　底皮下注射鹿角菜（鹿角菜需现用现配，避免变性而　存在误差），建立大鼠炎症痛模型。注射时间应该调　整在行为学测试之前的３　ｈ，注射后３～４　ｈ，大鼠后爪　将会出现明显红肿，皮温显著升高，此时将进行痛觉测　试；在进行致炎和灌胃实验之前，先要对大鼠进行热板　和压板｛贝４试的训练，主要目的是使大鼠熟悉测试环境，　从而减少因紧张或不熟悉环境而造成的实验误差。训　练总共需要进行７　ｄ，每天５轮，每轮３次。热板测试：　采用智能热板仪进行测试，智能热板仪的温度需要控　制为（５２＿＋０．３）ｏＣ。左手握住大鼠身体，右手持于大鼠　待测腿髋关节处，使其腿完全伸直，下压使得待测爪与　热板面的充分接触。接触时轻踏踏板开关开始计时，　后爪主动回缩离开热板表面时再次踏开关以停止，这　段时间作为大鼠后爪缩爪反应潜伏期（ＨＷＬ）。压力　测试：使用电子压痛仪进行测试。左手握住大鼠身体，　右手持于大鼠待测腿髋关节处，使其腿完全伸直，下压　使得其爪与实验小平面接触，接触时同时轻踏踏板开　１．１试验动物　本实验全部使用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠８　只，体重２００—２２０　ｇ，由吉林大学白求恩医学院动物实　验中心提供。在实验期间保持分笼饲养，自由进食和　基金项目：吉林省教育厅“十三五”科学技术研究基金（吉教科合字　２０１８）；长春师范大学自然科学基金项目（２０１６第００８号）　ｌ　吉林大学口腔医学院　通信作者：付立波（１９６５－），男，教授，博士，硕士生导师，主要从事动物　生理学研究。　第一作者：于晓利（１９８１一），男，主治医师，主要从事中医内科研究。　关，楔形有机玻璃下降落在大鼠后爪上，压力将以　３０　ｇ／ｓ的速度增进，同样方法测得大鼠对机械刺激的　ＨＷＬ。训练后大鼠对伤害性热刺激的ｔＩＷＩ　不得超过　于晓利等元胡水煮液对炎症痛大鼠的镇痛作用第１４期　５　ｓ，对伤害性机械刺激的ＨＷＬ不得超过６　ｓ。注射药　物前先测量３组ＨＷＬ作为基础值；注射药物后各时　异（均Ｐ＞０．０５）。给炎症痛大鼠灌胃４８　ｍｇ／ｍｌ元胡水　煮液与灌胃生理盐水作为对照，大鼠对热刺激和机械　刺激的ＨＷＬ变化百分比见表２，与对照组比较，炎症　痛大鼠灌４８　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液后的左、右爪机械刺激　的ＨＷＬ均有显著差异（均Ｐ＜０．０１），左、右爪热刺激　无明显差异（均Ｐ＞０．０５）。给炎症痛大鼠灌胃　９６　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液与灌胃生理盐水作为对照，大鼠　对热刺激和机械刺及的ＨＷＬ变化百分比见表３，与对　照组比较，炎症痛大鼠灌９６　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液后的　左、右爪热刺激和机械刺激的ＨＷＬ均有显著差异（均　Ｐ＜０．０１），即明显延长了大鼠的ＨＷＬ。　间点的ＨＷＬ以相对于基础值的变化百分比表示。　１．４统计学方法采用ＳＰＳＳ１８．０统计软件进行ｔ检验。　２　结果　给炎症痛大鼠灌胃２４　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液与灌胃　生理盐水作为对照，大鼠对热刺激和机械刺激的ＨＷＬ　变化百分比见表１，与对照组比较，炎症痛大鼠灌胃　２４　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液后左、右爪机械刺激的ＨＷＬ有　极显著差异（均Ｐ＜０．００１），左、右爪热刺激无明显差　表１灌胃２４　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液的炎症痛大鼠与对照组【生理盐水）大鼠的ＨｗＬ（　＝８）　与对照组同侧别比较：１）Ｐ＜０．００１　表２灌胃４８　ｍｇ／ｍｌ元胡水煮液的炎症痛大鼠与对照组大鼠ＨＷＬ比较（ｉ蟠，ｎ＝８）　与对照组同侧别比较：１）Ｐ＜０．０１，下表同　表３灌胃９６　ｍｇ／ｒｍ元胡水煮液的炎症痛大鼠与对照组大鼠的ＨＷＬ比较（ｉ　，ｎ＝８）　３讨论　果　引。此外，已有相关学者研究元胡止痛胶囊对小鼠　元胡史载于《开宝本草》，性温，味辛苦，人心、脾、　肝、肺，是活血化瘀、行气止痛之妙品，在临床上的应用　也并不少见，经过多年临床用药验证，具有良好行气止　痛，活血化瘀的功效，特别在治疗痛经方面有很好的效　活血镇痛的作用，结果表明元胡止痛胶囊可以明显改　善血瘀症小鼠的血液流变性，并有很好的镇痛效　果　引。也有研究发现，元胡止痛栓能够提高小鼠热板　法、大鼠甲醛法动物的痛阈；延长小鼠、大鼠痛经模型　中国老年学杂志２０１８年７月第３８卷　的扭体潜伏期、降低扭体次数及扭体发生率　７］，具有　良好的镇痛作用，并能够对抗催产素所致离体子宫平　滑肌的收缩作用　ｊ。元胡的镇痛作用机制主要是由　其内含有的化学成分决定，决定其镇痛作用的化学成　４参考文献　１黄２王欣．元胡止痛分散片的实验研究［Ｄ］．济南：山东大学，２００５．　颖，付立波．当归对炎症痛大鼠的痛觉调节作用［Ｊ］．中国老年　学杂志，２０１５；３５（４）：１２４－６．　３张笑恺．元胡止痛方治疗偏头痛的功效成分分析和作用机制研究　［Ｄ］．西安：第四军医大学，２０１５．　４李聪．催产素参与中缝背核对痛觉的调节作用［Ｄ］．长春：长春师　范大学，２０１５．　分有延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索癸素、延胡索丑　素，这些成分都为生物碱。已有研究证实延胡索乙素　的镇痛作用最强，次之为延胡索丑素，并且表明延胡索　乙素在治疗痛经时是通过抑制子宫收缩起到镇痛作　用。而在其他方面的镇痛作用主要是因为延胡索乙素　作为多巴胺２型受体的受体抑制剂，其抑制脊髓以上　Ｄ２受体达到镇痛作用。炎症痛是一种常见的慢性痛，　患有炎症痛的患者数不胜数。因此，研究新型镇痛类　药物具有重大的生理学意义。本实验结果表明，元胡　水煮液对炎症痛疼痛变化具有调节作用。　５陆岳涛，曹蔚，谢艳华，等．元胡止痛片及其主要成分对大鼠实验　性痛经的影响［Ｊ］．陕西中医，２０１３；３４（１）：ｌ１３＿４．　６刘建林，彭成，潘嫒，等．元胡止痛胶囊活血镇痛作用研究［Ｊ］．　中药药理与临床，２０１３；２９（５）：１１＿３．　７刘浪琪，吴庆光．元胡止痛膏的抗炎镇痛作用［Ｊ］．广东药学院学　报，２０１５；３１（２）：２３３．　８李见春，黄继汉．元胡止痛栓镇痛作用的实验研究［Ｊ］．中国临床理　学与治疗学，２００４；９（４）：４５９－６３．　［２０１８－０３－０９修回］　（编辑　曹梦园）　糖尿病大鼠心肌组织中自噬基因微管相关蛋白１轻链３的表达　刘晓健　陈睿琦　胡　峰　张秀冰　　王　艺　崔秀玲。　（锦州医科大学药理学教研室，辽宁　锦州　１２１００１）　［摘要］　目的探讨链脲佐菌素（ＳＴＺ）糖尿病（ＯＭ）大鼠心肌组织中自噬基因微管相关蛋白１轻链（Ｌｃ）３的表达情况。方　法实验分为对照组（ＮＣ组）、ＤＭ模型组（ＤＭ组），尾静脉注射ＳＴＺ制备模型后，分别在成膜后１Ｏ、２Ｏ、３Ｏ、４０、６ｏ、８Ｏ、１１３０　ｄ时，检测　与同时间点ＮＣ组相比，　两组心重指数，苏木素．伊红（ＨＥ）染色观察心肌形态学改变、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测ＬＣ３的蛋白表达。结果４０　ｄ时降低的趋势，但差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），而８０　ｄ时显著降低（Ｐ＜０．Ｏ１）。结论肌组织中ＬＣ３一ＩＩ的蛋白表达最终表现为降低。　［关键词］链脲佐菌素；糖尿病；心肌；自噬基因微管相关蛋白１轻链３；自噬　（中图分类号］１１５８７　［文献标识码］Ａ　４０　ｄ开始，ＤＭ组心重指数显著增加（Ｐ＜０．０５），心肌组织形态学发生改变；自噬体膜型（ＬＣ３一Ｈ）的蛋白表达表现为２０　ｄ时增多、　ＳＴＺ　ＤＭ模型大鼠随着病程的发展，心　［文章编号］１００５－９２０２（２０１８）１４－３４６４－０３：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－９２０２．２０１８．１４．０５０　自噬基因微管相关蛋白１轻链（ＬＣ）３是自噬的　道心肌中自噬潮的减少是ＤＭ过程中的一种适应性反　标志物，自噬形成时，胞浆型ＬＣ３（ＬＣ３．Ｉ）会酶解掉　小段多肽，转变为自噬体膜型（ＬＣ３一ｌＩ）。研究表明　一应，有自噬缺陷的ＤＭ心肌损伤反而减弱，增加自噬却　加重了ＤＭ心肌损伤。Ｋａｎａｍｏｒｉ等　报道Ⅱ型ＤＭ小　鼠心肌中自噬减少，而Ｉ型ＤＭ小鼠心肌中自噬却增　多。本研究探讨ＤＭ心肌损伤过程中自噬的变化。　１材料与方法　在多种疾病的发生发展与治疗过程中均可有自噬水平　的变化¨。　。糖尿病（ＤＭ）心肌病是ＤＭ的重要并发　症。Ｌｅｅ等　研究表明，持续的高糖环境心肌细胞出　现明显自噬，可能促进ＤＭ心肌病的发生。而另有学　者认为ＤＭ心肌中自噬不足促进了ＤＭ心肌病的发生　发展，增强自噬可延缓心功能的损伤　ｌ５］。ｘｕ等　报　基金项目：辽宁省自然科学基金（２０１４０２２０４０）；辽宁医学院校长基金一　奥鸿博泽基金大学生科技创新项目（２０１４Ｄ０４）；２０１５年辽宁　省大学生创新创业训练计划项目及地方高校国家级大学生　创新创业训练计划项目（２０１５１０１６０００９）　１锦州医科大学第一临床学院２０１２级１７班　２锦州医科大学第一临床学院２０１３级３班　３锦州医科大学第三附属医院内分泌科　第一作者：刘晓健（１９７２一），女，医学博士，副教授，主要从事心血管药理　学和肿瘤药理学研究。　１．１动物及模型建立健康雄性ＳＤ大鼠１２５只（购　自辽宁长生生物技术有限公司，ＳＹＸＫ（辽）２０１４　００１０），８周龄，体重（２４５＋２０）ｇ。适应性喂养１　Ｗ后，　对照组（ＮＣ组）４９只注射等体积柠檬酸．柠檬酸钠缓　冲液；ＤＭ模型组（ＤＭ组）８６只以尾静脉注射链脲佐　菌素（ＳＴＺ）５０　ｍｇ／ｋｇ，于注射后７２　ｈ测定空腹血糖　（ＦＢＧ），以ＦＢＧ≥１６．７　ｍｍｏｌ／Ｌ作为ＤＭ大鼠成模标　准。造模成功７２只，最终死亡８只，有１只出笼和１６　只因饲养过程中出现血糖回落于标准以下被剔除。饲　养期间，所有动物自由饮水、进食，每周监测体重和尾